[发明专利]细胞转核诱导体细胞成多能二倍体干细胞的方法

摘要

本发明公开了一种通过ESC细胞与哺乳动物体细胞融合而形成用于自体移植的、多潜能、二倍体ESL细胞的方法，包括如下步骤：a.提供ESC；b.废除ESC中的DNA复制能力；c.将非复制ESC与多个体细胞混合；d.通过向其中加入聚乙二醇，将非复制ESC和体细胞融合；e.将已融合细胞倒置悬滴培养，以生产聚集细胞；f.在稀释的琼脂糖凝胶上混悬培养聚集细胞，以生产EB，持续1-10代；g.在饲养细胞、涂层板和皿、或者在补充了生长因子的适宜培养基中的基质胶上培养EB；而且，h.选择具有与干细胞相同形态学特征并且包含哺乳动物特异性二倍体ESL细胞的、患者特异性ESL细胞的细胞集落。通过本发明的细胞转核诱导，成功使体细胞再生为多能二倍体干细胞。

主权项

一种通过ESC与哺乳动物个体的体细胞融合而形成用于自体移植的、多潜能二倍体ESL细胞的方法，该方法包括：a.提供ESC；b.废除ESC的DNA复制能力；c.将非复制的ESC与多个体细胞混合；d.通过向其中加入聚乙二醇，将所述非复制ESC和所述体细胞融合；e.倒置液滴培养经融合的细胞，以产生聚集的细胞；f.在稀释的琼脂糖凝胶上将所述聚集的细胞混悬培养1‑10代，以产生拟胚体(EB)；和g.在饲养细胞上或者在涂层板和皿上或者在补充了生长因子的适宜培养基的基质胶上培养EB；和h.选择具有干细胞典型形态并且包含哺乳动物个体特异性二倍体ESL细胞的细胞集落。