[发明专利]一种分析基因表达定量的方法有效
| 申请号： | 201110283718.2 | 申请日： | 2011-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN103014137A | 公开（公告）日： | 2013-04-03 |
| 发明（设计）人： | 章文蔚;张艳艳;龚梅花;彭智宇;韩祖晶;高欢;汪建;王俊;杨焕明;张秀清 | 申请（专利权）人： | 深圳华大基因科技有限公司;深圳华大基因研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市盐田*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分析基因表达定量的方法，所述方法包括：从总RNA中纯化mRNA，制备片段化mRNA；将所述片段化mRNA逆转录制备得到cDNA，将所述cDNA纯化后制备为平末端DNA，纯化所述平末端DNA；将所述平末端DNA片段制备得到末端加“A”碱基的DNA片段；在所述末端加“A”碱基的DNA片段两端加接头序列，得到两端加接头序列的DNA片段并进行纯化，对所述两端加接头序列的DNA片段进行PCR反应，纯化PCR反应产物；对所述PCR反应产物测序；将所述测序得到的数据过滤不合格序列得到干净序列，利用短序列映射程序将所述干净序列与参考序列比对，对所述比对结果进行分析。本发明有效的实现了定量准、可重复性高、费用低、检测阈值宽、信号噪音小等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分析 基因 表达 定量 方法 | ||
【主权项】：
一种分析基因表达定量的方法，其特征在于，包括：（1）从总RNA中纯化mRNA，制备片段化mRNA；（2）将所述片段化mRNA逆转录制备得到cDNA，将所述cDNA纯化后制备为平末端DNA，纯化所述平末端DNA；（3）将所述平末端DNA片段制备得到末端加“A”碱基的DNA片段；（4）在所述末端加“A”碱基的DNA片段两端加接头序列，得到两端加接头序列的DNA片段并进行纯化，对所述两端加接头序列的DNA片段进行PCR反应，纯化PCR反应产物；（5）对所述PCR反应产物测序；（6）将所述测序得到的数据过滤不合格序列得到干净序列，利用短序列映射程序将所述干净序列与参考序列比对，对所述比对结果进行分析。
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