[发明专利]莱氏野村菌微菌核诱导产生的方法

摘要

本发明公开了一种莱氏野村菌微菌核诱导产生的方法，对莱氏野村菌菌种活化，制备接种体，通过液体发酵培养，获得发酵液，对发酵液进行过滤，弃去上清液，得到微菌核和菌体，该方法可操作性强，重复性好，所用原料易于获取，产生的休眠结构微菌核性能稳定，易于保存，具有很强的杀虫生物活性，可以大批量生产、发酵周期短，生产成本低，为野村菌等虫生真菌制剂的规模化生产提供了新的方法。

主权项

一种莱氏野村菌微菌核诱导产生的方法，其特征在于按以下步骤进行：（1）把莱氏野村菌菌种活化，待用；（2）接种体制备：将活化的野村菌接种于SMAY培养基上，在25～28℃下连续光照培养144‑192h，用0.1%～0.5%的Tween80水溶液将平板上的孢子或菌丝体洗下，配制莱氏野村菌接种体悬浮液；（3）液体发酵诱导：将接种体加入诱导培养液中进行发酵培养，将所得的发酵液过滤，弃去上清液，得到沉淀微菌核和菌体，干燥，保存；所述诱导培养液单位体积内所含有的各种原料干物质重量如下：葡萄糖 10~50g/L，酵母膏5～10g/L，蛋白胨5～10g/L，KH2PO4 3～5g/L，CaCl2.2H2O 0.7～0.9g/L，MgSO4.7H2O 0.5～0.7g/L，FeSO4.7H2O 0.1～0.2g/L，CoCl2.6H2O 35～40mg/L，MnSO4.H2O 15～20mg/L，ZnSO4.7H2O 14～20mg/L，脱离子水配制；所述液体发酵的工艺条件为：培养基pH=5.4～6.5，温度为23~28℃，摇床转速为200～250rpm或者发酵罐转速为80～100rpm，培养时间为144～192h。