[发明专利]一种新的shRNA表达载体及其构建方法与应用无效
| 申请号： | 201110331036.4 | 申请日： | 2011-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN102533826A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 王升启;王学军;李英;胡伟;李丹丹;张秀娟;谢佩雯 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100850 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物医药领域，涉及一种用于新的shRNA的克隆表达载体及其构建方法与应用。所述的载体包括自主改造后的载体和酶切后的载体片段，及优化好的环碱基序列。所述的克隆方法包括合成双短链或单长链通过自身退火形成长双链DNA，将酶切后的载体和长双链DNA通过互补的粘性末端连接得到环形的DNA，并将其转化得到正确的基因克隆等步骤。利用本发明提供的载体shRNA克隆方法，采用优化后的回文结构环序列，且只需合成双短链或单长链，不仅提高了shRNA的疗效，而且能够快速，高效，低成本地克隆，可取代传统的克隆方法来实现shRNA克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 shrna 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种用于shRNA介导基因沉默的shRNA构建载体。其特征在于：采用PIII型H1启动子并对其3’端进行了突变使其最后3‑5个碱基均改变为T；含有两个SapI(或BspMI，BbvII，BsmI)酶切位点进行shRNA构建。
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