[发明专利]一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺有效
申请号: | 201110334701.5 | 申请日: | 2011-10-28 |
公开(公告)号: | CN102373216A | 公开(公告)日: | 2012-03-14 |
发明(设计)人: | 元昊;杨力 | 申请(专利权)人: | 元昊;杨力 |
主分类号: | C12N15/15 | 分类号: | C12N15/15;C07K14/815;C12N15/81;C12N1/19;C12P21/02;C12R1/78;C12R1/84 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 王秀奎 |
地址: | 300192*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种含有医用水蛭素基因的重组真核汉逊酵母工程菌株的构建及重组水蛭素的生产工艺。其中采用汉逊多型宿主细胞株RB-11为出发菌株来构建适用于生产的含有水蛭素的汉逊酵母高表达工程菌株RBHV145-6,并通过培养、发酵来获得高纯度和高含量的水蛭素。在本发明中,水蛭素基因以多拷贝的形式拷贝到宿主细胞的染色体上,且拷贝数保持稳定,含有水蛭素基因的外源基因表达盒完全整合到宿主细胞染色体上,种子库细胞、传代40、80代后的细胞中均无游离质粒存在,外源蛋白的表达量和分泌效率比酿酒酵母高10倍,特别和国内的多型汉逊酵母相比水蛭素外源蛋白的表达量高35.8%,且没有过度糖基化现象,因此适合于大规模发酵生产目的蛋白。 | ||
搜索关键词: | 一种 含有 医用 水蛭 基因 重组 真核汉逊 酵母 工程 菌株 构建 生产工艺 | ||
【主权项】:
一种医用水蛭素编码基因,其特征在于,具有序列表中SEQ ID No.1所述的核苷酸序列。
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