[发明专利]一种西索霉素发酵过程中补入种子液的方法

摘要

本发明涉及一种西索霉素发酵过程中补入种子的方法，它是以玉米淀粉、黄豆饼粉等为原材料，在微生物伊尼奥小单孢放线菌的作用下，种子经过三级扩大培养，在已发酵培养20-24小时的发酵罐中补入种子进行再发酵，当发酵培养48小时后，进行一次半料补入，当发酵培养80小时后，进行一次到多次的补水，来制备较高和稳定的西索霉素发酵液。本发明使发酵周期缩短了24小时左右，发酵过程中水、电用量也就相应地得到减少，节约了能源，降低了生产成本，有利于工业化大生产。

主权项

一种西索霉素发酵过程中补入种子的方法，它是以双种子发酵培养，生产较高和稳定的西索霉素发酵液，其特征在于包括如下步骤:1、单种子发酵制备：将上一级的种子经过培养合格后移入下一级种子罐中培养，最终移入发酵罐中,工序如下：1.1摇瓶种子的制备：摇瓶种子培养基经过灭菌冷却后，在无菌条件下，用接种针刮下斜面菌丝体于种子瓶中，置34±1℃摇床上培养40‑48小时后，下摇床备用；1.2一级种子的制备：一级种子培养基经过灭菌冷却后，在无菌条件下将摇瓶种子接入一级种子罐中34±1℃培养24‑36小时；1.3二级种子的制备：二级种子培养基经过灭菌冷却后，通过已灭菌过的移种管道将一级种子移入二级种子罐中培养，培养温度34±1℃，培养时间18‑24小时；1.4三级种子的制备：三级种子培养基经过灭菌冷却后，通过已灭菌过的移种管道将二级种子移入三级种子罐中培养，培养温度34±1℃，通气量1：1 v/v／min,培养时间18‑24小时；1.5发酵罐培养基的制备：发酵培养基经过灭菌冷却后，通过已灭菌过的移种管道将三级种子移入发酵罐中培养，培养温度34±1℃，通气量1：1 v/v／min,培养时间100‑120小时;2、备用种子的制备:间隔20‑24小时重复制备步骤1中所述1.1到1.4的各级种子的制备，将培养好的备用种子移入步骤1中所述工序1.5已发酵培养20‑24小时的发酵罐中再培养80‑100小时；3、半料培养基补入:上述步骤1中所述1.5中发酵液培养48小时后，补入半料培养;4、无菌水的补入：上述1中所述1.5中发酵液培养80小时后，补入无菌水。