[发明专利]一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法无效
申请号: | 201110344044.2 | 申请日: | 2011-11-03 |
公开(公告)号: | CN102391422A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
发明(设计)人: | 朱利民;凌元清;聂华丽 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C08F226/06 | 分类号: | C08F226/06;C08F220/06;C08F8/42;C07K1/32;C12N9/00 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法,包括:(1)将N-乙烯基己内酰胺与甲基丙烯酸溶解在去离子水中,得混合液,然后将所述的混合液置于反应容器中,真空脱气,再加入过硫酸铵水溶液,调节体系pH值至7.0,通氮气鼓泡后密封后,反应结束后,收集反应生成的沉淀,得到温敏聚合物PNVCL-co-MAA聚合物;(2)配制PNVCL-co-MAA的Tris-HCl缓冲液溶液,然后加入硫酸铜溶液,振荡反应,收集反应生成的沉淀,即得。本发明的制备方法简单,所使用的聚合物可回收利用,有效降低蛋白质分离纯化成本,适合规模化生产;本发明所制备的温敏型亲属螯合亲和沉淀剂,操作简单,反应时间短,蛋白吸附效果好。 | ||
搜索关键词: | 一种 温敏型 亲属 亲和 沉淀剂 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种温敏型亲属螯合亲和沉淀剂的制备方法,包括:(1)将0.25~2.0g N‑乙烯基己内酰胺与25~300μl甲基丙烯酸溶解在去离子水中,得混合液,然后将所述的混合液置于反应容器中,真空脱气,再加入0.1~0.60ml含有0.01~0.06g过硫酸铵的过硫酸铵水溶液,并调节体系pH值至7.0,通氮气鼓泡后密封后,在50~70℃反应1~3h;反应结束后加入氯化钠溶液沉淀,收集反应生成的沉淀,得到温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA聚合物;(2)用Tris‑HCl缓冲液将上述温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA配制成浓度为0.05~0.10g/ml的PNVCL‑co‑MAA的Tris‑HCl缓冲液溶液,然后加入浓度为0.1~0.6mol/L硫酸铜溶液,在室温下振荡反应0.5~2h,收集反应生成的沉淀,得到亲和温敏聚合物PNVCL‑co‑MAA‑Cu,即为该温敏型亲属螯合亲和沉淀剂。
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