[发明专利]一种耐高温Pyrolobus聚合酶及其高效表达质粒和应用无效
申请号: | 201110347185.X | 申请日: | 2011-11-07 |
公开(公告)号: | CN102392000A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
发明(设计)人: | 李志茹 | 申请(专利权)人: | 李志茹 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人: | 陈扬 |
地址: | 214043 江苏省无锡*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种耐高温Pyrolobus聚合酶及其高效表达质粒和应用,所述的Pyrolobus聚合酶为YP_004780419.1蛋白,在Pyrolobus聚合酶的碳端有用连接序列GGSG连接的Sso7dDNA结合蛋白;其中,Pyrolobus聚合酶的序列如序列表中的序列1所示。本发明通过在其末端连接DNA结合蛋白提高了聚合酶的效率,用体外合成修饰过的适合在大肠杆菌中表达的DNA合成重组Pyrolobus聚合酶,此酶和市场上拥有的产品有同样的聚合酶活力并可以更有效地合成大片段DNA。另外,Pyrolobus聚合酶有很强的耐高温性,即使在98℃下处理5h仍有活力,此酶将在DNA合成,测序及标记探针合成等领域有广泛应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 耐高温 pyrolobus 聚合 及其 高效 表达 质粒 应用 | ||
【主权项】:
一种耐高温Pyrolobus聚合酶,其特征在于:所述的Pyrolobus聚合酶为YP_004780419.1蛋白,在Pyrolobus聚合酶的碳端有用连接序列GGSG连接的Sso7d DNA结合蛋白;其中,Pyrolobus聚合酶的序列如序列表中的序列1所示;Sso7d DNA结合蛋白的序列如序列表中的序列3所示。
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