[发明专利]一种标记3,3’-二碘甲腺氨酸硫酸化物的方法及检测试剂盒

摘要

一种标记3,3’-二碘甲腺氨酸硫酸化物（3,3’-T2S）的方法及检测试剂盒，属于光激化学发光免疫分析技术领域。本发明首先采用3,3’-T2S与发光微粒偶联，将发光微粒标记到3,3’-T2S上。再由白色不透明微孔板，3,3’-T2S标准品，包被有3,3’-T2S的发光微粒，兔抗3,3’-T2S抗体冻干品，生物素化羊抗兔抗体冻干品和包被有链霉亲和素的感光微粒组成检测试剂盒。发光微粒上的3,3’-T2S与3,3’-T2S竞争连接到3,3’-T2S抗体，再与生物素化羊抗兔抗体及包被有链霉亲和素的感光微粒形成复合体，光激发下，通过单线态离子氧的产生和传递，将能量传递给发光微粒产生荧光，光信号强度与样品中3,3’-T2S浓度成反比，对照标准曲线测得样品中3,3’-T2S的含量。该3,3’-T2S检测试剂盒结构简单，操作简便、检测时间短、灵敏度高。

主权项

发光微粒标记3,3’‑T2S的方法，3,3’‑二碘甲腺氨酸硫酸化物简称3,3’‑T2S，其特征在于：在离心管中加入1mg发光微粒，加入12.5µL质量浓度1% Tween‑20，0.05mg 3,3’‑T2S，和10µL的25mg/mL硼氢化氰钠溶液，用pH6.0、0.1M的2‑(N‑吗啉)乙磺酸缓冲液将体积补充到200µL，37℃避光振荡反应48小时，加入10µL  pH 5.0、0.3M的羧甲氧基胺半盐酸盐溶液封闭未结合位点，37℃避光孵育1小时，离心纯化，洗去未反应的试剂后，分离得到包被有3,3’‑T2S的发光微粒，即为用发光微粒标记的3,3’‑T2S，稀释后备用。