[发明专利]一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法

摘要

本发明涉及一种高纯度墨蝶呤的提取纯化方法，该方法为将黄体色家蚕体壁用50%的乙醇按料液比1:20制成匀浆，煮沸10min，15000rpm，4℃离心30min，取上清液，过滤，滤液浓缩至一定体积后经ECTEOLA纤维素柱分离，先用纯水洗脱，待色素完全分离开间距超过5cm再用0.01M乙酸洗脱，将含目的色素条带的洗脱液浓缩至干后溶于适量纯水，经SephadexG-25-150柱纯化，纯水洗脱，洗脱液浓缩至干后溶于适量纯水，经磷酸纤维素柱进一步纯化，纯水洗脱，再将洗脱液浓缩至干，即得高纯度墨蝶呤。本发明工艺成熟，具有成本低廉、工序简单、产量大，所提取的墨蝶呤纯度高，等明显优势，适合大规模工业化生产高纯度墨蝶呤。

主权项

一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、解剖蚕体，尽可能剔除内脏组织，保存体壁；（2）、称取一定量的蚕体壁，用剪刀剪成碎片，按照料液比1:（18‑22）加入浓度为45‑55%的乙醇，用高速组织破碎机制成匀浆，在95‑105℃沸水浴中加热8‑12min；（3）、将加热后的匀浆进行离心分离，转速为15000rpm，离心温度为3‑5℃, 离心时间28‑32min，收集上清液；（4）、上清液通过滤纸进行过滤,在25‑30℃下减压真空浓缩滤液至原体积的1/5‑1/7；（5）、浓缩液经ECTEOLA纤维素柱吸附，先用纯水洗脱柱子，待色素完全分离开间距超过5cm后用0.01M乙酸洗脱柱子，收集含墨蝶呤色素条带的洗脱液；（6）、将洗脱液浓缩至干后溶解于适量纯水中，得到黄色溶液； (7）、黄色溶液经Sephadex G‑25‑150柱纯化，用纯水洗脱，收集色素洗脱液；（8）、重复步骤（6）；（9）、将黄色溶液用磷酸纤维素柱进一步纯化，用纯水洗脱，收集色素洗脱液；（10）、最后再将步骤（9）所得色素洗脱液浓缩至干，即得高纯度的墨蝶呤。