[发明专利]用于表达miRNA和/或蛋白的载体及其应用有效

专利信息
申请号: 201110416641.1 申请日: 2011-12-14
公开(公告)号: CN102517313A 公开(公告)日: 2012-06-27
发明(设计)人: 盛望;陈学斌;杨志平;曾毅;李泽琳 申请(专利权)人: 北京工业大学
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/66
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;任凤华
地址: 100124 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种用于表达miRNA和/或蛋白的表达载体及其应用。本发明所提供的表达载体是由线性载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR和两端各有一个粘性末端的双链DNA片段连接而成的环状表达载体;所述线性载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR的两个末端和所述双链DNA片段的两个粘性末端相连,并且两个连接处均形成限制性内切酶BsmB I的识别位点;所述DNA片段的内部还包括限制性内切酶Dra I的识别位点。实验证明,在表达miRNA方面,本发明所提供的表达载体为环形载体,可在大肠杆菌中大量扩增,克服了原始线性载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR一次性使用的缺陷,大大节约了实验成本;同时,本发明所提供的表达载体还可用于表达蛋白,克服了普通载体只能单一表达蛋白或表达miRNA的不足。
搜索关键词: 用于 表达 mirna 蛋白 载体 及其 应用
【主权项】:
一种表达载体,是由线性载体pcDNA6.2‑GW/EmGFP‑miR和两端各有一个粘性末端的双链DNA片段连接而成的环状表达载体;所述线性载体pcDNA6.2‑GW/EmGFP‑miR的两个末端和所述双链DNA片段的两个粘性末端相连,并且两个连接处均形成限制性内切酶BsmB I的识别位点。
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