[发明专利]一种脐带血调节性T细胞体外扩增及低温保存方法有效
| 申请号： | 201110425246.X | 申请日： | 2011-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN102517253A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 范华骅;杨洁;杨懿铭;任亚娜;谢如锋 | 申请（专利权）人： | 上海市血液中心 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A01N1/02;A61K35/44;A61K35/14;A61P37/02;A61P37/06 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 金重庆 |
| 地址： | 200051 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种脐带血调节性T细胞体外扩增及低温保存方法，所述的方法包括以下步骤：从脐带血中分离富含调节性T细胞的CD4+CD25+T细胞群；扩增所述富集后的CD4+CD25+T细胞群获得高纯度的调节性T细胞；将所述扩增后的调节性T细胞低温保存在液氮中，作为第三方无关供者调节性T细胞应用于临床疾病治疗。本发明优点在于：本发明所述的方法，可以从脐带血中获得大量的调节性T细胞，在液氮中长期保存，能够满足临床对调节性T细胞制品的需求，用于治疗移植物抗宿主病、器官移植排斥、自身免疫性疾病。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脐带血 调节 细胞 体外 扩增 低温 保存 方法 | ||
【主权项】：
一种脐带血调节性T细胞体外扩增及低温保存方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：a、用羟乙基淀粉代浆液分离脐带血中有核细胞，用密度梯度离心法分离得到脐带血单个核细胞，脐带血单个核细胞用免疫磁珠阴性分离步骤去除非CD4细胞得到CD4+细胞，脐带血CD4+细胞进一步用免疫磁珠阳性分离步骤分离出CD25+细胞，获得富含调节性T细胞的脐血CD4+CD25+T细胞；b、在细胞培养板或细胞培养袋中用连接CD3/CD28抗体的磁珠和重组人IL‑2扩增富集的脐带血CD4+CD25+T细胞，获得高纯度的调节性T细胞；c、将所述扩增后的调节性T细胞低温保存在液氮中。
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