[发明专利]一种利用三亲配对接合并以石油烃为唯一碳源筛选携带石油烃降解基因的可自转移广宿主质粒的方法有效
| 申请号： | 201110439161.7 | 申请日： | 2011-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN102517279A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 李慧;王亚菲;张颖;徐慧;韩斯琴;史荣久;杨伟超;陈冠雄 | 申请（专利权）人： | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 110164 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及生物学技术和污染土壤生物修复技术交叉领域，具体的说一种利用三亲配对接合并以石油烃为唯一碳源筛选携带石油烃降解基因的可自转移广宿主质粒的方法。选用不同的Proteobacteria亚纲的染色体带有选择标记的受体菌与携带不能自我转移(Tra-Mob+)并带选择标记质粒的供体菌，通过与样品三亲配对接合，供体菌的质粒在样品中的可自转(Tra+Mob+)广宿主质粒的协助下进入受体菌，接合子通过受体菌和供体菌质粒带有的选择标记进行筛选。再将筛选的含有可自转广宿主质粒的接合子在以石油烃为唯一碳源的培养基中培养，筛选能够降解石油烃的广宿主质粒。采用本发明提供的三亲配对接合法”能够从石油污染土壤中直接分离降解正辛烷、多环芳烃萘、芴和菲的广宿主代谢质粒，从而为进一步采用该质粒进行污染土壤生物修复提供了遗传材料。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 配对 接合 石油 唯一 碳源 筛选 携带 降解 基因 转移 宿主 质粒 方法 | ||
【主权项】：
一种利用三亲配对接合并以石油烃为唯一碳源筛选携带石油烃降解基因的可自转移广宿主质粒的方法，其特征在于：选用不同的Proteobacteria亚纲的染色体带有选择标记的受体菌与携带不能自我转移(Tra‑Mob+)并带选择标记质粒的供体菌，通过与样品三亲配对接合，供体菌的质粒在样品中的可自转(Tra+Mob+)广宿主质粒的协助下进入受体菌，接合子通过受体菌和供体菌带有的筛选标记进行筛选，再将筛选的含有可自转广宿主质粒的接合子在以石油烃为唯一碳源的培养基中培养，筛选能够降解石油烃的广宿主质粒。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院沈阳应用生态研究所，未经中国科学院沈阳应用生态研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201110439161.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
