[发明专利]一种微量磷酸化多肽除盐小柱

摘要

一种微量磷酸化多肽除盐小柱。它以反相C18与聚吡咯复合物为分离材料，利用聚吡咯氮原子上的正电荷与带负电的磷酸基团间的静电作用，聚吡咯不饱和双键与芳香氨基酸残基的∏-∏堆积作用，弥补C18固定相单一疏水相互作用的不足，增强了分离材料与目标分子的相互作用。以吡咯和过硫酸铵为原料，在室温下经超声后，再经过清洗、装填、封口制得微量磷酸化多肽除盐小柱。本发明制备的聚吡咯修饰石英材料分离效率高、纯度和稳定性高。该材料能用于酸性条件和碱性条件，因此常规C18固定相所不能检测的多肽得以检测，信噪比高，干扰小。本发明方法简单，不需要复杂的仪器，能够有效富集低丰度磷酸化多肽，样品分析操作简单，无需复杂的样品前处理。

主权项

一种微量磷酸化多肽除盐小柱，其特征在于：该小柱利用反相C18与聚吡咯复合物做分离材料，采用下述方法制成，制备包括以下步骤：1)、称取0.01克石英棉于离心管，加入1毫升去离子水和25微升吡咯，超声10分钟；2)、将100微升浓度为20微克/微升过硫酸铵水溶液快速加入步骤1)所得的混合物中，涡流使其快速混匀，再超声10分钟；3)、取步骤2)得到聚吡咯修饰石英棉用乙醇清洗，并保存于乙醇溶液中；4)、将保存在乙醇溶液中的聚吡咯修饰石英棉装填于含C18反相分离材料的微量ZipTipC18移液管，用移液器将之填紧；5)、密封微量移液管上端即得。