[发明专利]一种提取高纯度微囊藻毒素的方法

摘要

本发明涉及一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，先将铜绿微囊藻水样经液氮反复冻融，将冻融后的水样离心取上清液备用，对C18固相萃取柱预处理，将水样中MC-LR用C18固相萃取柱富集纯化；将MC-LR溶出并浓缩得到产品。本发明可提取得到毫克级MC-LR，杂质少，纯度高；采用液氮冻融的方法使藻细胞破壁，操作方法简便，且可以使细胞内胞外MC-LR完全释放出来，而且环保、安全、经济。

主权项

一种提取高纯度微囊藻毒素的方法，其特征是，包括步骤如下：(1)水样预处理：将铜绿微囊藻水样经液氮反复冻融2‑4次，以破碎藻细胞，释放胞内微囊藻毒素MC‑LR，然后将冻融后的水样离心取上清液备用；(2)SPE固相萃取柱的预处理、MC‑LR的富集与纯化：用甲醇清洗固相萃取柱2‑4次，再用超纯水清洗2‑4次；向清洗后的固相萃取柱内通入步骤(1)的上清液过柱，过柱完后用甲醇水溶液作淋洗液清洗富集了MC‑LR的固相萃取柱，除去杂质；(3)MC‑LR的溶出与浓缩：用100％甲醇作为洗脱液清洗富集了MC‑LR的固相萃取柱以洗脱MC‑LR，使MC‑LR溶出，将溶出的MC‑LR‑甲醇混合溶液置于旋转蒸发仪，40‑60℃，旋转蒸发10‑20min。