[发明专利]核酸样品的制备方法及组合物有效

专利信息
申请号: 201180068485.2 申请日: 2011-12-27
公开(公告)号: CN103502463A 公开(公告)日: 2014-01-08
发明(设计)人: M.W.埃舒;J.皮库里;S.莫特利 申请(专利权)人: 艾比斯生物科学公司
主分类号: C12P19/34 分类号: C12P19/34
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 林毅斌;万雪松
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 本文公开了用于在通用缓冲液中制备核酸文库(例如应用全基因组扩增)的组合物和方法,其中在步骤之间或步骤期间不需要核酸的纯化。应用少量起始核酸(例如,基因组DNA)并且所述步骤在单一容器中完成。可对所述核酸文库进行测序方法或滚环扩增。
搜索关键词: 核酸 样品 制备 方法 组合
【主权项】:
 一种在通用缓冲液中制备核酸文库的方法,所述方法包括:a)将核酸样品与通用缓冲液混合,其中所述通用缓冲液包含dNTP和引物;b)将所述通用缓冲液与多种基本上纯化的酶接触,其中所述酶有聚合酶活性、激酶活性和磷酸酶活性,并且其中所述接触在使得产生扩增的核酸的条件下进行;c)处理所述通用缓冲液使得产生剪切的扩增核酸;d)处理所述通用缓冲液以灭活所述聚合酶的活性;和e)将所述通用缓冲液与连接酶和核酸接头在使得产生连接接头的核酸文库的条件下接触;其中以上步骤在所述通用缓冲液中完成而无需核酸纯化。
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