[发明专利]一种菊芋碳源培养彩绒革盖菌诱导草酸脱羧酶的方法有效
| 申请号： | 201210002911.9 | 申请日： | 2012-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN102533707A | 公开（公告）日： | 2012-07-04 |
| 发明（设计）人： | 洪枫;宫搏阳;杨雪霞 | 申请（专利权）人： | 东华大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12R1/645 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201620 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种菊芋碳源培养彩绒革盖菌诱导草酸脱羧酶的方法，包括：(1)浸提菊芋汁；(2)将上述菊芋汁稀释至7-100g/L的总糖量，补加氮源和无机盐获得发酵培养基，调节pH值至4.0-5.0，灭菌后备用；(3)以3-15vol％的接种量将彩绒革盖菌的菌丝体种子液接入发酵培养基培养2-6天；(4)待菌丝球形成时，加入终浓度为1-100mM的草酸诱导产生草酸脱羧酶，培养0.5-6天后获取菌丝体；(5)将上述菌丝体经冷冻后破碎，然后用醋酸缓冲液提取菌丝碎片，去除残渣，即得草酸脱羧酶粗酶液。本发明工艺简单，成本低，效率高；底物诱导产草酸脱羧酶不受抑制，产酶量稳定。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 菊芋 碳源 培养 彩绒革盖菌 诱导 草酸 脱羧酶 方法 | ||
【主权项】：
一种菊芋碳源培养彩绒革盖菌诱导草酸脱羧酶的方法，包括：(1)将菊芋在105℃汽蒸15‑30min，然后按照1∶1‑1∶10的质量比加水，匀浆得到菊芋浆；在30‑120℃下浸提0.5‑3h，过滤，离心，得到菊芋汁；(2)将上述菊芋汁稀释至7‑100g/L的总糖量，补加氮源和无机盐获得发酵培养基，调节pH值至4.0‑5.0，灭菌后备用；(3)以3‑15vol％的接种量将彩绒革盖菌的菌丝体种子液接入发酵培养基，在10‑30℃和100‑250rpm条件下培养2‑6天；(4)待菌丝球形成时，加入终浓度为1‑100mM的草酸诱导产生草酸脱羧酶，培养0.5‑6天后获取菌丝体；(5)将上述菌丝体经破碎或冷冻后破碎，然后用0.2M、pH 3.7的醋酸缓冲液提取菌丝碎片，去除残渣，即得草酸脱羧酶粗酶液。
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