[发明专利]一种从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法

摘要

本发明公开了一种从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，该方法是以胶原蛋白为原料，溶于水后调整pH值为7.0~9.0，然后加入占胶原蛋白原料质量的1/5000~5/100的胰蛋白酶，30~45℃条件下酶解，反应完成后升高温度到55~65℃保温10~30分钟使胰蛋白酶失活，得到胶原蛋白酶解液，在15~60℃温度范围内，采用截留分子量为3,000~20,000道尔顿的滤膜过滤或采用凝胶过滤色谱法过滤，收集滤液得到胶原蛋白多肽溶液，最后依次通过亲和色谱柱和反相色谱柱，收集洗脱液，冷冻干燥，所得粉末即为RGD活性多肽。本发明的方法操作简便，产品品质高，所得RGD活性多肽适用于医药、食品及化妆品等多个领域。

主权项

一种从胶原蛋白制备RGD活性多肽的方法，其特征在于步骤如下：（1）将胶原蛋白溶于水，调节pH值为7.0~9.0；（2）酶解：在胶原蛋白水溶液中加入胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶或胃蛋白酶，加入量为胶原蛋白质量的1/5000~5/100， 30~45℃条件下酶解，酶解时间为0.5~8小时，用2,4,6‑三硝基苯磺酸衍生‑分光光度法测定酶解液吸光度，当吸光度不再增长时视为酶解完成，升高温度到55~65℃保温10~30分钟使胰蛋白酶失活，终止反应，得到胶原蛋白酶解液；（3）过滤：在15~60℃温度范围内，采用截留分子量为3,000~20,000道尔顿的滤膜过滤或采用凝胶过滤色谱法过滤，收集滤液得到胶原蛋白多肽溶液；（4）将胶原蛋白多肽溶液依次通过亲和色谱柱和反相色谱柱，收集洗脱液，冷冻干燥，所得粉末即为RGD活性多肽。