[发明专利]人β-防御素3在酵母菌表达系统中的表达方法无效
申请号: | 201210012016.5 | 申请日: | 2012-01-16 |
公开(公告)号: | CN102586256A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 唐语谦;吴晖;肖俊梅;汪芳;袁琨;李晓凤;刘冬梅;余以刚;肖性龙 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/81;C07K14/47 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 何淑珍 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了人β-防御素3在酵母菌表达系统中的表达方法,载体质粒为pPIC9k,目的蛋白为45个氨基酸,导入前采用SacI酶对重组质粒进行线性化。该生产工艺可使人β-防御素3基因在甲醇诱导启动子的驱动下获得高水平表达,并将人β-防御素3表达产物分泌到发酵液培养基中,为人β-防御素3更大规模工业化生产提供可靠的实验依据。 | ||
搜索关键词: | 防御 酵母菌 表达 系统 中的 方法 | ||
【主权项】:
人β‑防御素3在酵母菌表达系统中的表达方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)目的基因hBD‑3的扩增;(2)双酶切hBD‑3基因与载体pPIC9k,连接构建重组载体,转化宿主菌巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris);(3)筛选后的转化子再用甲醇诱导培养,离心所得上清液中即为人β防御素3。
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