[发明专利]一种青蟹眼柄RNA的提取方法有效
| 申请号： | 201210016953.8 | 申请日： | 2012-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN102559662A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 皮妍;朱厚泽;蒋科技;张凤英;于忠利;张丹;孙曼曼;房娅博;马凌波 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院东海水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 200090 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种青蟹眼柄RNA的提取方法，以RNAiso Plus试剂为基础，通过在提取过程中RNA悬液中加入1/3悬液量5mol/L醋酸钾后快速离心混合再进行沉淀及采用-70℃条件沉淀RNA，经上述改进后能提取出较好满足实验要求的眼柄部位的RNA。本发明从难以提取的青蟹眼柄组织中提取出RNA，消除沉淀RNA过程中析出的大量乳白色沉淀，得到高质量的RNA，从而克服常规方法提取青蟹眼柄RNA质量不能保证的间题，同时对其他甲壳类生物眼柄组织提取RNA提供了启示，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 青蟹眼柄 rna 提取 方法 | ||
【主权项】：
一种青蟹眼柄RNA的提取方法，包括：(1)在液氮中将青蟹标本的眼柄组织研磨成粉末，取部分加入RNAiso Plus试剂后室温静置离心，取上清液；(2)在上述上清液中加入1/5上清液体积的氯仿，混匀，室温静置离心，获得水相、蛋白相和氯仿相，取水相；(3)在上述水相中加入1/3水相体积的醋酸钾溶液，室温离心、静置；加入等体积的异丙醇，混匀，‑70℃静置、室温离心，弃上清液保留沉淀；(4)在上述沉淀中加入乙醇，室温离心，弃上清液保留沉淀；干燥，用DEPC水溶解沉淀，得青蟹眼柄RNA。
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