[发明专利]一种液体蛋白质浓度检测方法

摘要

一种液体蛋白质浓度检测方法，属于食品检验、检测技术领域，其方法是：液体样品中蛋白质与三价铁卟啉结合后形成复合物，具有过氧化物酶功能，催化过氧化氢(H2O2)产生活性氧，氧化鲁米诺，鲁米诺形成一个有机过氧化物。该过氧化物很不稳定，立即分解出氮气，生成激发态的氨基邻苯二甲酸。激发态至基态转化中，释放的能量以光子的形式本检测，通过检测反应前后光子数的变化，可计算出待测液体样品中蛋白质的量。有益效果是：具有灵敏度高、干扰性低及经济实用等特点，可广泛应用于医药卫生及食品生产企业、农贸市场、质量监督、卫生防疫等部门对食品安全进行监测领域。

主权项

一种液体蛋白质浓度检测方法，其方法是：试剂组成是以TMB为底物的实验步骤实验试剂a、三价铁卟啉试剂，4‑20μM/L；b、pH 7.4PBS：KH2PO40.2g，Na2HPO4.12H2O 2.9g，NaCL 8.0g，KCL 0.2g，加水至1L；c、四甲基联苯胺使用液，TMB0.5mL，底物缓冲液10mL，0.75％H2O232μL；d、终止液，蒸馏水178.3mL，逐滴加入浓硫酸21.7mL；实验方法将三价铁卟啉试剂与不同浓度的蛋白样品用PBS稀释并混匀，在96孔板上每孔加入100μL与蛋白混合液，此时每孔内三价铁卟啉试剂的浓度在4‑20μM/L，既每孔内含0.2‑1μg次血红素或0.4‑2μg次血红素六肽，然后每孔100μL加入TMB使用液，此时三价铁卟啉试剂的终浓度为2‑10μM/L；反应开始10min后，每孔加入50μL终止液，然后酶标仪检测450nm吸光值；操作过程①将液体样品加入到装有三价铁卟啉试剂的试管中，室温下10分钟；②向①试管中分别加入过氧化氢试剂和鲁米诺试剂，将试管中液体移至发光检测仪中，室温下1分钟进行反应前光子计数；③室温下5分钟时，进行反应后光子计数，计算反应前后光子数 的变化，定量测定出待测液体样品中蛋白质的含量。