[发明专利]一种产毒微囊藻特异性多重PCR检测方法及其试剂盒

摘要

本发明所要解决的技术问题在于，为了克服现有技术中存在的对产毒微囊藻检测方法复杂、仪器要求高等问题，提供一种产毒微囊藻特异性多重PCR检测方法及其试剂盒。一种产毒微囊藻特异性多重PCR检测方法，包括如下步骤：(1)从检测地取样微囊藻，并提取基因组DNA；(2)设计合成微囊藻，包括产毒和非产毒株的ropC1基因和产毒微囊藻mcyA、mcyB、mcyD、mcyE、mcyI、mcyJ基因片段的7对引物；(3)使用上述设计的特异性引物分别进行PCR扩增反应，最后进行电泳凝胶检测。本发明以多个基因作为分子指标，提高了检测精度，操作简便，易于掌握，可快速检测出水体中的微囊藻，并能有效识别是否为产毒株。

主权项

一种产毒微囊藻特异性多重PCR检测方法，包括如下步骤：(1).从检测地取样微囊藻，并提取基因组DNA，(2).设计并合成微囊藻包括产毒和非产毒株的ropC1基因和产毒微囊藻mcyA、mcyB、mcyD、mcyE、mcyI、mcyJ基因片段的7对引物：引物       序列(5’→3’)rpoC1 TCF1  CAGTTATCTCAGTATCCTGCTCG，rpoC1 TCR1  ACTTCATCCAAGACGTGCC；mcyA TCF1   GCATCGGAGACAGAAACAGG，mcyA TCR1   AAGTTACCCAAACCGAAAGG；mcyB TCF1   CCAAACTGGTGCCGAATC，mcyB TCR1   CAAGATGACAAAGGCAGAAGG；mcyD TCF1   GCCATTTAGAAGGTGCTGC，mcyD TCR1   GGCTGAGTGATTTGGGTTTC；mcyE TCF1   CAAACTGCTCCAGGTATCATTG，mcyE TCR1   TGAGTCTGGGAGATTAAAGTCG；mcyI TCF1   TTGGTACTCTGGTGGCTCAC，mcyI TCR1   CTCCTCCTGAAGCACTTGTAAT；mcyJ TCF1   TGACCGCTTTAGAATGTGCT，mcyJ TCR1   ACTAATTCCTTGGCTAATCTGG。(3).使用上述设计的特异性引物分别进行PCR扩增反应，最后进行电泳凝胶检测。