[发明专利]一种HBD3气管上皮特异性表达载体及其构建的重组细胞有效
申请号: | 201210039495.X | 申请日: | 2012-02-21 |
公开(公告)号: | CN102533857A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 苏峰;张涌;王勇胜;罗艳;余源;李倩;刘军;权富生 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/873 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 陆万寿 |
地址: | 712100 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞,构建了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3,以及基于该载体的包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞系,利用该细胞系作为核供体细胞,为解决奶牛结核病的转基因奶牛提供坚实的基础。本发明通过电转染法将外源性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3导入牛胎儿成纤维细胞,荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况,并经G418筛选获得阳性细胞,经PCR鉴定,证实目的基因HBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组;最后,将转染HBD3基因的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚。 | ||
搜索关键词: | 一种 hbd3 气管 上皮 特异性 表达 载体 及其 构建 重组 细胞 | ||
【主权项】:
一种HBD3气管上皮特异性表达载体,其特征在于,包含目的基因HBD3,在HBD3基因的上游连接有SEQ.ID.NO.1所示的MUC1启动子序列。
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