[发明专利]一种诊断急性髓细胞白血病的试剂盒有效
申请号: | 201210058451.1 | 申请日: | 2012-03-07 |
公开(公告)号: | CN102643899B | 公开(公告)日: | 2015-02-11 |
发明(设计)人: | 李云森;王征;王艳萍 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 陶海锋 |
地址: | 215123 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种诊断急性髓细胞白血病的试剂盒,包括:逆转录体系和PCR扩增体系;其特征在于,所述逆转录体系包括:重复T寡核苷酸OlogodT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs;所述PCR扩增体系包括:SYBRGreen聚合酶链反应体系、引物对;其中,所述逆转录反应液含有焦炭酸二乙酯处理的水、M-MLV逆转录酶缓冲液;所述SYBRGreen聚合酶链反应体系含有PCR缓冲液、模板cDNA、dNTPs、SYBRGreen荧光染料;所述引物对为可扩增人Lc3合成酶β3Gn-T5和人β-actin的引物对。本发明建立了利用SYBRGreen技术检测Lc3合成酶β3Gn-T5的表达的方法,并提供一种可以方便准确灵敏地诊断急性髓细胞白血病的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 一种 诊断 急性 细胞 白血病 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种诊断急性髓细胞白血病的试剂盒,包括:逆转录体系和PCR扩增体系;其特征在于,所述逆转录体系包括:重复T寡核苷酸Ologo dT、逆转录反应液、RNA酶抑制剂、dNTPs;所述PCR扩增体系包括:SYBR Green聚合酶链反应体系、引物对;其中,所述逆转录反应液含有焦炭酸二乙酯处理的水、M‑MLV逆转录酶缓冲液;所述SYBR Green聚合酶链反应体系含有PCR缓冲液、模板cDNA、dNTPs、SYBR Green荧光染料;所述引物对为可扩增人Lc3合成酶β3Gn‑T5和人β‑actin的引物对;所述引物对由上游引物和下游引物组成,其中人Lc3合成酶β3Gn‑T5上游引物具有SEQ ID No.1所示序列:5′‑ttttggattggtcgtgttcat‑3′;下游引物具有SEQ ID No.2所示序列:5′‑cggctgtgtagtcagggtaag‑3′;人β‑actin上游引物具有SEQ ID No.3所示序列:5′‑CACCATTGGCAATGAGCGGTTCC‑3′;下游引物具有SEQ ID No.4所示序列:5′‑GTAGTTTCGTGGATGCCACAGG‑3′。
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