[发明专利]一种新的分枝杆菌菌种快速鉴定方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种用于分枝杆菌菌种鉴定的双标记探针检测和溶解曲线分析方法，以及利用所述方法同时鉴定多种分枝杆菌的试剂盒。本发明中的试剂盒包括针对分枝杆菌16S rRNA基因设计的引物和能够鉴定分枝杆菌菌种的双标记寡核苷酸探针，以及一种热稳定的且不具有5’核酸酶活性的DNA聚合酶。本发明中的检测方法和试剂盒能检测和/或鉴定24种常见分枝杆菌。根据探针与不同菌种的序列杂交产生不同Tm值的熔解峰判读结果，可同时快速、准确地检测分枝杆菌，鉴别分枝杆菌与非分枝杆菌及结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌，鉴定分枝杆菌菌种，3-4小时即可报告结果，从而辅助临床诊断、指导临床开展早期有效的化疗。

主权项

一种用于鉴定分枝杆菌菌种的试剂盒，其中包括两对引物和三条探针，所述两对引物包括引物TBleft1、TBleft2、TBright1和TBright2，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示，所述三条探针TBProbe1、TBProbe2、TBProbe3的5’端用报告荧光染料标记，3’端用淬灭荧光染料标记，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15所示。