[发明专利]一种重组胸腺肽α1的制备方法有效
| 申请号： | 201210086281.8 | 申请日： | 2012-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN102660568A | 公开（公告）日： | 2012-09-12 |
| 发明（设计）人： | 蒋为民;柴向东;丁佳萱;罗豪晖;赵秦;朱瑞东;韩杰;高琰 | 申请（专利权）人： | 深圳市海王英特龙生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P21/02;C07K14/575;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人： | 黄韧敏 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明利用基因重组技术制备重组胸腺肽α1，包括人工合成融合蛋白基因并将所述融合蛋白基因重组到载体质粒pet-22b中构建表达载体，将该表达载体转化到宿主大肠杆菌中构建工程菌，将所述工程菌进行发酵并诱导融合蛋白表达，对表达产物进行纯化制备后得到融合蛋白目标产物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 胸腺肽 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组胸腺肽α1的制备方法，包括以下步骤：1)人工合成胸腺肽α1的融合蛋白基因全序列，所述基因序列如SEQ ID NO.1所示；2)将合成的基因酶切后，重组到质粒pet‑22b上构建表达载体，并将表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中构建工程菌；3)将工程菌发酵培养，以乳糖作为诱导剂诱导融合蛋白表达；4)将步骤3)获得的表达产物按下述步骤进行纯化，制备重组胸腺肽α1；4a)收集经发酵培养的工程菌，悬浮菌体，用超高压均质机破碎，得细胞破碎液；4b)用中空纤维滤膜过滤细胞破碎液，得滤液I；4c)滤液I经亲和层析后，再经超滤，得滤液II；4d)用肠激酶水解滤液II后，用亲和层析和HPLC纯化出胸腺肽α1。
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