[发明专利]美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶草斑潜蝇的鉴定方法有效
| 申请号： | 201210087961.1 | 申请日： | 2012-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN102605085A | 公开（公告）日： | 2012-07-25 |
| 发明（设计）人： | 吴佳教;胡俊韬;李志江;顾渝娟;刘海军;李春苑;胡学难 | 申请（专利权）人： | 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心;中国农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510600 广东省广州市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种斑潜蝇的鉴定方法，具体是根据美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶草斑潜蝇的mtDNA COI序列分别合成各自的特异引物，以所述三种斑潜蝇基因组DNA为模板，分别同时进行使用相同模板但引物不同的三次PCR扩增获得各自的PCR反应产物，取各自的PCR反应产物检测、染色、观察并成像，如果美洲斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且其分子量为250-500bp，确定为美洲斑潜蝇；如果南美斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且其分子量为550-600bp，确定为南美斑潜蝇；如果三叶草斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且分子量为450-550bp，确定为三叶草斑潜蝇。本发明操作简单、可重复性强，灵敏度高且具有稳定、快速的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 美洲 斑潜蝇 南美 三叶草 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶草斑潜蝇的鉴定方法，其特征在于：所述美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶草斑潜蝇的鉴定方法是根据美洲斑潜蝇、南美斑潜蝇、三叶草斑潜蝇的mtDNA COI序列分别合成各自的特异引物，以所述三种斑潜蝇基因组DNA为模板，分别同时进行使用相同模板但引物不同的三次PCR扩增获得各自的PCR反应产物，取各自的PCR反应产物，在琼脂糖凝胶、电泳缓冲液中电泳检测，且染色后，在凝胶成像系统中观察并成像，同时，对扩增中出现特异性条带的扩增产物直接判定为相应特异引物扩增的针对种，如果在使用美洲斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且其分子量大小为250‑500bp且包括端值，确定该斑潜蝇为美洲斑潜蝇；如果在使用南美斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且其分子量大小为550‑600bp且包括端值，确定该斑潜蝇为南美斑潜蝇；如果在使用三叶草斑潜蝇特异引物的PCR反应产物电泳结果中有明亮的扩增带，且其分子量大小为450‑550bp且包括端值，确定该斑潜蝇为三叶草斑潜蝇。
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