[发明专利]一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法

摘要

本发明公开了一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法，属于污水处理领域。本发明转基因细菌的制备步骤为首先用MGM培养基对盐碱地中的嗜盐菌进行筛选；再用苯酚培养基对黄河水中的降酚细菌进行分离；然后用饱和盐水对嗜盐菌进行处理，最后经过电击法，电脉冲法，高温加热把嗜盐基因导入降酚细菌。本发明转基因细菌针对性强，效率高，提供了一种降解大于20%盐浓度废水中酚的转基因细菌，具有显著的经济效益和社会效益，广阔的应用前景。

主权项

一种降解高盐度废水酚转基因细菌的培养以及应用方法,其特征在于培养方法为：(1)以盐碱土壤为嗜盐菌菌源,在温度为35~40°C，pH 7.5～8.5条件下用MGM培养基进行筛选培养2～3d，作为嗜盐菌菌源，冷藏保存；(2)以黄河水为细菌菌源，在温度35~37°C，pH7.0～8.0条件下用苯酚培养基进行筛选培养16～24h，作为降酚细菌菌源，冷藏保存；(3)把嗜盐菌放入饱和盐水中，电击6‑8h，然后加热到60~70℃，加热3～5min，得到混合液，待冷却后PEG沉降，去除沉淀，保留上清液；(4) 用CaCl2溶液处理降酚细菌，然后把降酚细菌加入上清液中，涂抹于苯酚培养基上，在温度为35~37°C 条件下培养6‑7d，作为转基因细菌菌源；(5)把得到的转基因细菌涂抹于改良的苯酚培养基上在温度为35~40°C ，pH 7.5～8.5条件下培养3‑4d筛选出转基因细菌。