[发明专利]一种利用内含肽制备胸腺素多肽的方法

摘要

本发明公开了一种利用内含肽制备胸腺素多肽的方法，该方法包含步骤1，合成胸腺素α-1基因片段；步骤2，利用核酸内切酶、连接酶将合成的胸腺素α-1基因融合入纯化标签基因和内含肽基因中，获得融合蛋白重组基因，并导入宿主细胞中；步骤3，发酵该宿主细胞获得胸腺素融合蛋白；步骤4，利用纯化标签对步骤3所得的融合蛋白进行纯化；步骤5，对步骤4所得的融合蛋白进行切割，获得胸腺素28肽单体；步骤6，对该28肽单体进行乙酰化，获得天然结构的胸腺素α-1；步骤7，纯化所得的天然结构胸腺素α-1。本发明提供的制备胸腺素多肽的方法，使多肽在宿主细胞中易于表达，工艺简单、成本低，易于操作和工业化，且对环境无污染。

主权项

一种利用内含肽制备胸腺素多肽的方法，其特征在于，该方法包含：步骤1，合成胸腺素α‑1基因片段；步骤2，利用核酸内切酶、连接酶将合成的胸腺素α‑1基因片段融合入纯化标签基因和内含肽基因中，获得融合蛋白重组基因，并导入宿主细胞中进行表达；步骤3，发酵该宿主细胞，使其表达目的融合蛋白从而获得胸腺素融合蛋白；步骤4，利用所述的纯化标签对步骤3所得的融合蛋白进行纯化，得到纯化后的融合蛋白；步骤5，利用内含肽的自剪切效应对步骤4所述纯化后的融合蛋白进行裂解，获得胸腺素28肽单体；步骤6，加入乙酰化试剂对步骤5所述的胸腺素28肽单体的N末端进行乙酰化修饰，获得天然结构的胸腺素α‑1；步骤7，纯化所得的天然结构胸腺素α‑1。