[发明专利]化合物泽泻醇A的制备方法及其具有致肾毒性作用的应用无效
| 申请号： | 201210133989.4 | 申请日： | 2012-05-03 |
| 公开（公告）号： | CN102675396A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 陈晓辉;毕开顺;于治国;俞悦;马超;耿璐璐 | 申请（专利权）人： | 沈阳药科大学 |
| 主分类号： | C07J13/00 | 分类号： | C07J13/00;G01N21/31;G01N21/64 |
| 代理公司： | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人： | 李宇彤 |
| 地址： | 110016 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供一种具有致肾毒性作用的化合物泽泻醇A的制备方法和实验方法，所要解决的问题是：现代临床实践与药理实验仅限于对中毒现象的描述，而其致肾毒性作用的物质基础却不甚明确。本发明的要点是：（1）制备泽泻乙醇提取液；（2）制备氯仿萃取物；（3）化合物泽泻醇A的纯化；（4）使用MTT法测定泽泻醇A对HKC细胞的增殖抑制作用；（5）Hoechst33342-PI荧光双染法观察细胞形态学变化。本发明的积极效果是：为中药泽泻的合理应用和致肾损伤的防治提供依据。 | ||
| 搜索关键词： | 化合物 泽泻 制备 方法 及其 有致 毒性 作用 应用 | ||
【主权项】：
具有致肾毒性作用的化合物泽泻醇A的制备方法，其特征是：（1）制备泽泻乙醇提取液取泽泻，加入其重量3~5倍的70%~95%乙醇，冷浸10~15 h，加热回流提取4~6 h，过滤，反复2~4 次，合并滤液，经旋转蒸发仪50 ℃蒸干溶剂，得泽泻乙醇提取液的浸膏；（2）制备氯仿萃取物将泽泻乙醇提取液的浸膏用水混悬后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等体积萃取，各2~4 次，合并氯仿萃取液，经旋转蒸发仪 50℃ 蒸干溶剂，得到氯仿层萃取物；（3）化合物泽泻醇A的纯化取氯仿萃取物，硅胶柱层析（200 ~ 300 目），用二氯甲烷‑甲醇按照1:0，50:1，40:1，20:1，10:1，7:1，4:1，2:1，1:1，0:1的梯度洗脱，其中，按50:1洗脱得到的流分Fr.73～Fr.80 (Fr.为“流分fraction”的缩写，Fr.73～Fr.80指柱层析分离所得组分中第73至第80个组分) 先经过进一步的硅胶柱层析，再经Sephadex LH 20（葡聚糖凝胶）凝胶柱层析，得到的流分经制备型高效液相分离纯化，得到无色粉末状化合物泽泻醇A。
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