[发明专利]一种宽叶羌活组织培养离体快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种宽叶羌活组织培养离体快速繁殖方法，该方法包括以下步骤：⑴外植体的选择和消毒处理：以宽叶羌活的根芽为外植体，经浸泡灭菌、冲洗，即得消毒后的外植体单芽；⑵外植体接种：将消毒后的外植体单芽接种在诱导芽分化培养基上形成2~3个丛生芽；⑶继代增殖培养：将2~3个丛生芽接种到继代增殖培养基上形成宽叶羌活丛生苗；⑷生根诱导：将宽叶羌活丛生苗分株后转入生根培养基中培养，形成完整再生小苗；⑸育苗基质消毒；⑹植株移栽：将完整再生小苗直接移栽到消毒后的育苗基质中，炼苗后即长成正常宽叶羌活植株。本发明克服了宽叶羌活育苗周期过长、繁殖系数低的问题，易于操作、可进行工厂化快速育苗。

主权项

一种宽叶羌活组织培养离体快速繁殖方法，包括以下步骤：⑴外植体的选择和消毒处理：以宽叶羌活的根芽为外植体，经流水冲洗15~30分钟，用体积浓度为75%的酒精浸泡灭菌20~30秒，然后以无菌去离子水冲洗2~3次，再将冲洗后的外植体置于质量浓度为0.1%~0.2%的升汞中，浸泡灭菌8~13分钟，并用无菌去离子水冲洗3~6次，即得消毒后的外植体单芽；⑵外植体接种：将所述消毒后的外植体单芽接种在诱导芽分化培养基上，其中每25ml所述诱导芽分化培养基中接种1棵所述消毒后的外植体单芽；在温度为20℃±2℃、光源为日光灯、光强为30~60 umol . m‑2. s‑1、光照时间为12 h .d‑1的条件下培养25~30天，使根芽基部形成2~3个丛生芽；⑶继代增殖培养：将所述2~3个丛生芽接种到继代增殖培养基上，其中每25ml所述继代增殖培养基中接种1棵所述丛生芽；在温度为20℃±2℃、光源为日光灯、光强为30~60 umol . m‑2. s‑1、光照时间为12 h .d‑1的条件下培养25~35天，形成宽叶羌活丛生苗；⑷生根诱导：将所述宽叶羌活丛生苗分株后转入生根培养基中，其中每25ml所述生根培养基中接种1棵所述宽叶羌活丛生苗；在温度为20℃±2℃、光源为日光灯、光强为30~60 umol . m‑2. s‑1、光照时间为12 h .d‑1的条件下培养20~30天后，小苗基部出现白色、粗壮短根，并长出完整根系，即得完整再生小苗；⑸育苗基质消毒：将育苗基质在115~121℃温度下进行高温消毒，15~20min后即得消毒后的育苗基质；所述育苗基质是指腐殖质与珍珠岩按2：1重量比混合而成的混合基质；⑹植株移栽：将所述完整再生小苗直接移栽到所述消毒后的育苗基质中，炼苗后即长成正常宽叶羌活植株；所述一棵完整再生小苗种植在所述消毒后的育苗基质10cm2的范围内。