[发明专利]Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用无效
| 申请号： | 201210145475.0 | 申请日： | 2012-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN103387976A | 公开（公告）日： | 2013-11-13 |
| 发明（设计）人： | 唐旭东;赵双;杨永;宋瑜丽;谢志勇 | 申请（专利权）人： | 广州市容大生物技术有限公司;深圳清华大学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/70;C07K19/00;C07K1/22 |
| 代理公司： | 深圳市睿智专利事务所 44209 | 代理人： | 陈鸿荫;郭文姬 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种Tβ4-EGF融合基因的制备及其应用，根据人Tβ4基因库序列设计引物，以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET-32a为模板进行PCR扩增；在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1；再以重组质粒pTXB1-Tβ4为模板，设计引物，采用两步PCR法扩增获得Tβ4-EGF融合基因；所述引物含有NdeI和XhoI酶切位点。与现有技术相比，具有以下技术效果：本发明Tβ4-EGF融合蛋白以可溶性非包涵体形式存在，经几丁质亲和层析柱纯化，纯化操作简便，表达纯度高，经Tβ4-EGF融合蛋白处理后，培养的3T3细胞增殖速度加快，增殖得到促进。 | ||
| 搜索关键词： | egf 融合 基因 制备 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种Tβ4‑EGF融合基因的制备方法，其特征在于：根据人Tβ4基因库序列设计引物，以插入人Tβ4完整编码区基因的质粒pET‑32a为模板进行PCR扩增；在T4DNA连接酶的作用下定向连接至载体pTXB1；再以重组质粒pTXB1‑Tβ4为模板，设计引物，采用两步PCR法扩增获得Tβ4‑EGF融合基因；所述引物含有Nde I和Xho I 酶切位点。
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