[发明专利]基于阴离子交换柱高效分离出高活性水蛭素的生产工艺

摘要

本发明是基于一种新型阴离子交换柱（DEAE-硅胶分离柱），实现高效分离纯化水蛭素。以广西菲牛蛭制成的蚂蝗粉为原材料，属于中药制药领域，涉及动物有效成分的提取，目的是解决水蛭素提取复杂、成本高、难以工业化生产的问题。本发明的特征在于围绕这种新的价格低廉的DEAE-硅胶分离柱的分离纯化系统，设计了水蛭素分离纯化的新工艺。本工艺简单快速，成本低；并且所得到的水蛭素冻干粉活性高，回收率高，纯度高，保存期长，可为食品、保健食品、药品或化妆品等行业提供安全、优质的原料。

主权项

一种基于阴离子交换柱高效分离出高活性水蛭素的生产工艺，其特征在于包括下述步骤：（1）从蚂蝗粉中粗提水蛭素：按照材料重量的2‑6倍加入三氯乙酸提取液，离心，上清备用；沉淀继续重复提取两次，所有上清液混合，调节上清液pH至4.0左右，加三倍冷丙酮沉淀，0‑8℃静置过夜，回收上清中的丙酮，沉淀去丙酮备用；（2）DEAE‑硅胶柱分离纯化：向上述步骤(1)所得沉淀中加1‑10倍量的超纯水，充分溶解，用DEAE‑硅胶柱中压液相色谱进行分离纯化，并收集水蛭素峰位置洗脱液，备用；（3）脱盐浓缩：把步骤(2)中所得上清液进行透析，中间换水2‑8次，每次间隔不小于2h；透析过的上清液通过旋转蒸发(40‑70℃，0‑250r/min)进行浓缩，0‑8℃冷藏备用；（4）于冻干机冻干，收集后密封保存。