[发明专利]检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒

摘要

检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，涉及一种PCR试剂盒。所述检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒包括HER2基因PCR反应液、ACTB基因PCR反应液、Taq酶系、对照品和包装物；采用的引物为环状引物，在5’端存在3-8个自行设计的碱基，在合适条件下可以和3’端序列相互结合为双链，可有效地避免了非特异扩增产物尤其是引物二聚体形成，并增加其专一性。利用相对定量实时RT-PCR的方法来检测乳腺癌患者中HER2基因表达水平，采用2-△△Ct值法对检测结果进行定量，可用于乳腺癌的早期及转移的诊断，辅助临床用药的选择和预后判断等多个领域。

主权项

检测HER2基因表达水平的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于包括HER2基因PCR反应液、ACTB基因PCR反应液、Taq酶系、对照品和包装物；所述HER2基因PCR反应液由PCR反应缓冲液、HER2基因特异性上游引物、HER2基因特异性下游引物和EVA Green荧光染料组成；所述ACTB基因PCR反应液由PCR反应缓冲液、ACTB基因特异性上游引物、ACTB基因特异性下游引物和EVA Green荧光染料组成；所述HER2基因特异性上游引物F序列为：5’‑GTCCGTCCTACAACTACCTTTCTACGGAC‑3’；所述HER2基因特异性下游引物R序列为：5’‑TGAGAAGGGCTTGCTGCACTTCTCA‑3’；所述ACTB基因特异性上游引物F序列为：5’‑CAGGATTCCTGGGCATGGAGTCCTG‑3’；所述ACTB基因特异性下游引物R序列为：5’‑CGCCAACAGACAGC ACTGTGTTGGCG‑3’；其中，引物5’端和3’端带有下划线的碱基为参与形成引物内双链结合区的碱基；所述PCR反应缓冲液由100mM Tris‑HCL、50mM KCL、10mM MgSO4、50mM（NH4）2S04和25mM dNTPs组成。