[发明专利]鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法无效
申请号: | 201210234670.0 | 申请日: | 2012-07-06 |
公开(公告)号: | CN102716473A | 公开(公告)日: | 2012-10-10 |
发明(设计)人: | 耿照玉;陈兴勇;何艳;姜润深;时丹 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | A61K39/00 | 分类号: | A61K39/00;A61P43/00;C12N15/70;C12R1/19 |
代理公司: | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人: | 丁瑞瑞 |
地址: | 230000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,简略步骤包括:提取、酶切、诱导、纯化、浓缩、混合、注射。本发明的优点在于将重组表达的融合催乳素蛋白应用于鹅主动免疫,通过调控体内激素水平提高鹅的繁殖性能,不仅可解决常规选育难以剔除就巢性状的难题,同时,也可避免人为注射性激素类物质所导致的药物残留等问题。 | ||
搜索关键词: | 鹅产蛋 融合 催乳素 蛋白 主动 免疫 调控 方法 | ||
【主权项】:
一种鹅产蛋的融合催乳素蛋白主动免疫调控方法,其特征在于,步骤包括:(1)通过RT‑PCR,从鹅下丘脑和垂体组织总RNA抽提物中扩增出全长PRL靶序列,并插入EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点;(2)再插入PMD19‑T载体,与pET32a双酶切并连接,转化DH5α;(3)使用IPTG诱导3小时,以分泌型表达;(4)诱导表达后的菌珠经高压超声破碎,离后上清溶液过Ni‑亲和层析柱,纯化产物透析后冻干浓缩,得到融合催乳素表达蛋白,经蛋白定量后,将浓缩蛋白分别稀释至1~4mg/ml;(5)将融合催乳素表达蛋白与佛氏完全佐剂以1:0.8~1.2的质量比混合;(6)将混合物对鹅颈部皮下多点注射,注射剂量为1.5~2.5ml。
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