[发明专利]一种检测肿瘤细胞EGFR基因突变的方法及芯片无效

专利信息
申请号: 201210247470.9 申请日: 2012-07-17
公开(公告)号: CN102732636A 公开(公告)日: 2012-10-17
发明(设计)人: 白玉杰;薛丽 申请(专利权)人: 海南医学院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C40B40/06
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 冯琼
地址: 571199 *** 国省代码: 海南;66
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摘要: 发明涉及生物技术领域,公开了一种检测肿瘤细胞EGFR基因突变的方法,该方法以SEQ ID NO:1-8所示序列为引物、待测样品DNA为模板进行PCR扩增,SEQ ID NO:9-24所示序列的探针分别与所得扩增产物杂交,然后洗涤除去未结合的扩增产物,最后与偶联金纳米微粒的链亲和素孵育,根据金纳米微粒颜色变化判断突变结果。本发明基于芯片技术,利用生物素和链亲和素特异性结合的特征,将针对与吉非替尼、厄洛替尼等药物敏感性或耐药性相关的EGFR基因突变的探针组成芯片点阵,与生物素标记的扩增产物杂交后,用偶联金纳米微粒的链亲和素与扩增产物上标记的生物素特异性结合,从而准确判读突变结果。
搜索关键词: 一种 检测 肿瘤 细胞 egfr 基因突变 方法 芯片
【主权项】:
一种检测肿瘤细胞EGFR基因突变的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、以SEQ ID NO:1‑8所示序列为引物、肿瘤细胞DNA为模板进行PCR扩增,获得扩增产物,其中SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8所示序列的5'端均修饰有生物素;步骤2、SEQ ID NO:9‑24所示序列的探针分别与步骤1所得扩增产物杂交,然后洗涤除去未结合的扩增产物,最后与偶联金纳米微粒的链亲和素孵育,根据金纳米微粒颜色变化判断突变结果。
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