[发明专利]以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体及其培育方法

摘要

本发明公开了一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法。所述的培育方法为：将蛹虫草子实体在固体培养基上经孢子分离提纯复壮，得到蛹虫草菌丝体，挑选转色好，转色快，贴着培养基长势快的菌丝体留种；将留种菌丝体经用液体培养基振荡培养，制成液体菌种；对金蝉幼虫进行处理，在蝉幼虫身体上用无菌针扎小洞，用无菌注射器吸入液体菌种注入蝉幼虫体后背；将已注射感染的蝉幼虫置于无菌的组培瓶内，用注射器将0.1ml液体菌种注入蝉幼虫外体，盖上瓶盖，黑暗保湿培养，再光照20天，注入无菌水，继续培养，至蝉花子实体长至3cm长。本发明方法与天然蝉花相比，营养与药用成分相当，质量好，感染成功率高，出草率高，时间短，成本低。

主权项

一种以蝉幼虫为寄主的蝉花子实体的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步：将蛹虫草子实体在固体培养基上经孢子分离提纯复壮，得到蛹虫草菌丝体，培养温度为20℃，培养时间12天，淘汰绒毛多不转色的菌丝体，挑选转色好，转色快，贴着培养基长势快的菌丝体留种；第二步：在20℃‑22℃，120r/m的条件下，将第一步得到的留种菌丝体经用液体培养基振荡培养4‑5天，并且有小菌球充满液体培养基，制成液体菌种；第三步：用消毒剂对金蝉幼虫进行浸泡消毒10分钟，然后用无菌水洗三次，用紫外灯照2小时，最后在蝉幼虫身体上用无菌针扎小洞8个，前胸4个，后胸4个，用无菌注射器吸入第二步得到的液体菌种注入蝉幼虫体后背；第四步：将第三步得到的已注射感染的蝉幼虫置于无菌的组培瓶内，用注射器将0.1ml液体菌种注入蝉幼虫外体，盖上瓶盖，黑暗保湿培养3天，温度为18℃‑23℃，湿度为80‑100％；然后在20℃下培养20天，光照为12h/d，光照强度为在150‑250lx，打开瓶盖，注入2ml无菌水，继续培养30‑40天，至蝉花子实体长至3cm及以上长，即收获。