[发明专利]PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法无效
| 申请号： | 201210272737.X | 申请日： | 2012-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN102808024A | 公开（公告）日： | 2012-12-05 |
| 发明（设计）人： | 许龙岩;袁慕云;曹际娟;唐勤;邹志飞 | 申请（专利权）人： | 许龙岩;袁慕云;曹际娟;唐勤;邹志飞 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/63 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510623 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种PCR-焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物、试剂盒和检测方法。本发明根据副溶血弧菌toxR基因(GenBank:NC_004603.1)序列中的保守区域，用PyroMark Assay Design软件设计PCR引物和测序引物，建立了PCR-焦磷酸测序，从DNA碱基序列水平上检测副溶血弧菌的方法。本发明先对目标片段进行PCR扩增，保证扩增片段的特异性，再用扩增产物制备单链模板，在测序引物的引导下进行焦磷酸测序。检测的所得碱基序列，用NCBI网站的BLAST功能反复比对时发现，toxR基因测序引物后的碱基序列具有良好的特异性，测序引物后34bp连续DNA序列为：CCAAGGATTCACAGCAGAAGCCACAGGTGCTTTT的就可鉴定含有VP。 | ||
| 搜索关键词： | pcr 磷酸 检测 溶血 弧菌 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】：
一种PCR‑焦磷酸法检测副溶血弧菌的检测引物，其特征在于，包括PCR引物和测序引物：PCR引物：上游引物F：GAGATTCCGCTGGGTTTGTAA；下游引物R：TGAACCAGAAGCGCCAGTAGTAC；测序引物S：AAATAACGCGTGGAAT。
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