[发明专利]黄鳝芳香化酶保守区的原核表达载体pMAL-Arom19及其构建方法和应用方法

摘要

本发明提供一种Arom19的原核表达载体pMAL-Arom19，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点RBS和Arom19基因保守区片段及一个麦芽糖结合蛋白标签。构建此载体的方法为采用RT-PCR方法从黄鳝脑中扩增出长约639bp的目的序列Arom19基因保守区，克隆至T载体中，经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后，将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-Arom19。利用该载体转化大肠杆菌实现Arom19保守区蛋白的高水平表达，进一步纯化获得高纯度的重组Arom19蛋白质。实验证实，用本发明提供载体制备Arom19保守区蛋白具有较强的免疫原性，能刺激机体产生免疫应答。

主权项

黄鳝芳香化酶保守区的原核表达载体pMAL‑Arom19，其特征在于：所述原核表达载体由表达载体pMAL‑c2x构建而得，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点PBS、Arom19基因保守区序列及一个麦芽糖结合蛋白标签序列。