[发明专利]一种抗菌剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种抗菌剂及其制备方法。采用PCR技术从苜蓿尺蠖核型多角体病毒（AcMNPV）中克隆类芋螺毒素基因（ctl），构建中间载体pFastBac-Pie1-ctl，经转座后构建含有ctl基因的重组杆状病毒，感染离体培养的昆虫细胞，离心收集细胞外表达产物，胞外表达产物对金黄色葡萄球菌、微球菌、短小芽孢杆菌等多种临床致病菌具有抑制活性。本发明借助昆虫-杆状病毒表达系统高效表达CTL类抗菌剂，安全性高，在医药、食品等领域具有潜在的应用价值。

主权项

一种含有ctl基因、Pie1启动子的中间载体pFastBac‑Pie1‑ctl，其特征在于，它的结构如图2所示，它通过下述步骤构建得到：（1）根据苜蓿尺蠖核型多角体病毒的ctl基因设计引物，以苜蓿尺蠖核型多角体病毒基因组DNA作为模板进行PCR扩增，经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后，将ctl基因连入pMD18‑T，形成含有ctl基因的重组质粒pMD18‑T‑ctl；（2）利用SnaBI和BamHI将家蚕核型多角体病毒的Pie1启动子取代pFastBac1上原有的多角体基因启动子，得到pFastBac1‑Pie1；用BamHI和KpnI切割重组质粒pMD18‑T‑ctl，回收ctl基因片段，克隆到pFastBac1‑Pie1，构建含有ctl基因的中间载体pFastBac‑Pie1‑ctl。