[发明专利]一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒复制非必需基因的方法有效
| 申请号： | 201210288003.0 | 申请日： | 2012-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN103589745A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | 田凤鸣;陈剑清;舒特俊;张耀洲 | 申请（专利权）人： | 天津耀宇生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/66;C12N15/63;C12N15/09 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 张瑾 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区开发区洞庭路*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒BmNPV复制非必需基因的方法，所述方法以BmNPV为材料，通过PCR对其一个复制非必需片段两端的同源序列进行扩增并克隆至载体pUC19中；通过重叠PCR法依次拼接BmNPV的IE1早期启动子、标记基因(EGFP)、终止序列SV40polyA，并克隆至上述载体pUC19获得重组转移载体pUC19-lef7-IE1-EGFP-SV40polyA-gp64；将该载体与野生BmNPV的基因组共转染BmN细胞，经同源重组获得带有荧光标记的重组病毒RBmNPV-EGFP；将其基因组DNA与不带有标记基因的转移载体pUC19-lef7-gp64共转染BmN细胞，通过同源重组获得不带有荧光标记基因的重组病毒RBmNPV。本发明解决了重组病毒基因组中带有标记基因的问题，提高了阳性重组病毒的筛选效率，且此标记基因可以被反复利用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 靶向 家蚕 核型 多角体 病毒 复制 必需 基因 方法 | ||
【主权项】：
一种带有标记基因的转移载体的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(a)用重叠PCR的方法制备三联体基因：IE1‑EGFP‑SV40polyA；(b)将步骤(a)所得的IE1‑EGFP‑SV40polyA克隆至载体pUC19中，获得所述转移载体pUC19‑IE1‑EGFP‑SV40polyA。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津耀宇生物技术有限公司，未经天津耀宇生物技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201210288003.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：在使用发动机启停自动控制装置时辅助驾驶员
- 下一篇：获取应用程序的方法和装置
