[发明专利]一种醋酸去氨加压素的制备方法

摘要

一种醋酸去氨加压素的制备方法，属于多肽类药物生产技术领域，具体制备方法为：将RinkAMResin和Fmoc-Gly-OH进行反应，生成Fmoc-Gly-AMResin，然后依次偶合Fmoc-D-Arg-OH等基团生成Fmoc-Mpa(trt)-Tyr(tBu)-Phe-Gln(trt)-Asn(trt)-Cys(trt)-Pro-D-Arg-Gly-AMResin，脱Fmoc后裂解、氧化得到1-6成环的Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-NH3，最后纯化、真空冻干得到醋酸去氨加压素。本方法收率高、成本低、环境友好、有利于规模化生产。

主权项

一种醋酸去氨加压素的制备方法，其特征在于具体制备方法如下：（1）制备Fmoc‑Gly‑AM Resin：Rink AM Resin用二氯甲烷浸泡至充分溶胀，用N,N‑二甲基甲酰胺洗涤，然后用25%哌啶/N,N‑二甲基甲酰胺脱Fmoc保护基，洗涤后得到A产物；取Fmoc‑Gly‑OH，1‑羟基苯并三唑，N,N’‑二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N‑二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入A产物，在25~35℃反应2~4 h后洗涤，得到Fmoc‑Gly‑AM Resin；（2）制备Mpa(trt)‑Tyr(tBu)‑Phe‑Gln(trt)‑Asn(trt)‑Cys(trt)‑Pro‑D‑Arg‑Gly‑AM Resin：将步骤（1）所得Fmoc‑Gly‑AM Resin加入固相合成管中，用25%哌啶/N,N‑二甲基甲酰胺脱Fmoc‑Gly‑AM Resin上的Fmoc保护基，，洗涤后得到B产物；取Fmoc‑D‑Arg‑OH，1‑羟基苯并三唑，N,N’‑二异丙基碳二亚胺加入到无水N,N‑二甲基甲酰胺中，在0~5℃活化后加入B产物，在25~35℃反应1~3 h后洗涤，得到Fmoc‑ D‑Arg‑Gly‑AM Resin；重复上述过程，依次偶联Fmoc‑Pro‑OH、Fmoc‑Cys(trt)‑OH、Fmoc‑Asn(trt)‑ OH、Fmoc‑Gln（trt）‑OH、Fmoc‑Phe‑OH、Fmoc‑Tyr(tBu)‑OH、Mpa(trt)‑OH，全部偶联完毕后，得到Mpa(trt)‑Tyr(tBu)‑Phe‑Gln(trt)‑Asn(trt)‑Cys(trt)‑Pro‑D‑ Arg‑Gly‑AM Resin；（3）裂解Mpa(trt)‑Tyr(tBu)‑Phe‑Gln(trt)‑Asn(trt)‑Cys(trt)‑Pro‑D‑Arg‑Gly‑AM Resin：将三氟乙酸与苯甲硫醚按照质量比94:6混合配制成裂解液，取裂解液，加入步骤（2）制备好的Mpa(trt)‑Tyr(tBu)‑Phe‑Gln(trt)‑Asn(trt)‑Cys(trt)‑Pro‑D ‑Arg‑Gly‑AM Resin中，裂解初始温度为0~5℃，保持0.5~1h，逐渐升到20~30℃，保持1~2h，得到Mpa‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys‑Pro‑D‑Arg‑Gly‑NH3；（4）氧化成环：将步骤（3）制备得到的Mpa‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys‑Pro‑D‑Arg‑Gly‑NH3加入适量纯化水中，配制成2g/L溶液，加入氧化剂双氧水1ml/L氧化液，反应1.5~2.0h，得到Mpa‑Cys成环的Mpa‑Tyr‑Phe‑Gln‑Asn‑Cys‑Pro‑D‑Arg‑Gly‑NH3；最后经过高效液相纯化和真空冻干得到高质量醋酸去氨加压素。