[发明专利]一种尼泊司他汀生产工艺

摘要

本发明公开了一种尼泊司他汀生产工艺，包括如下流程：A、用发酵液培养基和去离子水配制发酵液；B、发酵；C、发酵产物纯化；所述发酵液培养基采用以下原料制成：甘油、黄豆粉、卵磷脂、葵花油、硫酸镁和碳酸钙；配制成的发酵液中，上述各原料的百分比含量分别为：甘油1％-4.5％、黄豆粉2％-6.5％、卵磷脂1.5％-4％、葵花油5％-12％、硫酸镁0.01％-0.15％、碳酸钙0.05％-0.4％。本发明以黄豆粉、葵花油、甘油等作为发酵培养基的主要氮源和碳源，并通过调控发酵工艺及培养基组份，采用毒三素链霉菌经过发酵、纯化、精制而获得高纯度尼泊司他汀，使尼泊司他汀的生产成本大大降低，发酵效价提高，解决了现有技术中存在的生产成本高、发酵效价低的缺点。

主权项

一种尼泊司他汀生产工艺，其特征在于：包括如下流程：(A)用发酵液培养基和去离子水配制发酵液所述发酵液培养基采用以下原料制成：甘油、黄豆粉、卵磷脂、葵花油、硫酸镁和碳酸钙；配制成的发酵液中，上述各原料的百分比含量分别为：甘油1％‑4.5％、黄豆粉2％‑6.5％、卵磷脂1.5％‑4％、葵花油5％‑12％、硫酸镁0.01％‑0.15％、碳酸钙0.05％‑0.4％；(B)发酵(B1)在发酵液中接种毒三素链霉菌菌种，菌种的接种量为发酵液的2％‑10％，菌种的细菌浓度为15％‑25％；(B2)菌种发酵过程中，发酵液的温度控制在26℃‑29℃，发酵时间为6‑8天；(B3)菌种发酵过程中，采用酸碱自动平衡来调节发酵液的pH值，使pH值维持在6.8～7.8之间；(B4)菌种发酵过程中，通过通气量和搅拌速度自动调节发酵液的溶氧水平，使溶氧水平维持在35％以上，所述搅拌速度为60‑160rpm；(C)发酵产物纯化，包括如下步骤：(C1)发酵结束后，酸化处理发酵液，使发酵液的pH值调节为1‑6，并采用喷雾干燥的方法获得干菌丝体；(C2)将干菌丝体加入1‑14倍体积的丙酮溶液中，浸泡4～12小时，半框过滤除去菌丝，收集滤液；(C3)在滤液补加纯水，制得丙酮浓度为35％～55％的丙酮稀释液；(C4)向丙酮稀释液中加入正庚烷，并进行萃取，萃取后收集正庚烷相；(C5)对正庚烷相进行减压浓缩，至无馏分析出，制得正庚烷浓缩液；(C6)向正庚烷浓缩液中加入乙腈，冷却后，分层除油；(C7)收集乙腈相，并对其减压浓缩，至无馏分析出，制得乙腈浓缩液；(C8)用己烷稀释乙腈浓缩液，然后，上硅胶柱进行吸附；(C9)吸附完毕后，用己烷洗脱，收集洗脱液；(C10)对洗脱液进行减压浓缩，至无馏分析出；(C11)二次结晶，收集晶体，减压浓缩，制得高纯度尼泊司他汀。