[发明专利]体外制备轮状病毒双层类病毒颗粒的方法

摘要

本发明涉及轮状病毒双层类病毒颗粒的制备方法，包括从裂解上清中纯化轮状病毒VP6蛋白，由VP2蛋白和VP6蛋白构成的双层类病毒颗粒的体外组装，所述蛋白和类病毒颗粒可用于预防或减轻轮状病毒感染导致的临床症状。

主权项

1.一种制备轮状病毒双层类病毒颗粒的方法，所述双层类病毒颗粒包含轮状病毒VP2蛋白和VP6蛋白，所述方法包括以下步骤：a)在原核表达系统中以可溶形式表达VP6，并进行纯化，纯化后的VP6蛋白保持其正确构象，以三聚体形式存在；b)将纯化后的VP6与非颗粒状态的VP2共组装形成双层颗粒2/6‑VLP；其中所述双层类病毒颗粒2/6‑VLP的组装包括将VP6和VP2蛋白混合后，将缓冲液更换至组装缓冲液而组装成双层类病毒颗粒，其中：i)VP2、VP6为未组装成颗粒的纯化的蛋白，其纯度为95％以上；ii)组装缓冲液为磷酸盐缓冲液，MES缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，其pH介于4.0～6.4；iii)组装缓冲液含150mM～2M的NaCl；iv)VP2和VP6的质量比介于1：1～1：10。