[发明专利]一种蛇龙珠葡萄品种葡萄病毒病的脱除与苗木快繁方法

摘要

本发明提供了一种蛇龙珠葡萄品种葡萄病毒病的脱除与苗木快繁方法，包括营养系初选、试管苗茎尖培养、热处理脱毒、试管苗移栽驯化、病毒检测、无病毒苗木快繁步骤；其有益效果为：经过使用本发明方法蛇龙珠葡萄品种的脱毒效果可达90%以上，能够突出生产目的性，使脱毒工作更加简捷、有效，节省了人力、物力和财力，有效提高了该葡萄品种的成活率。

主权项

一种蛇龙珠葡萄品种葡萄病毒病的脱除与苗木快繁方法，其特征在于包括营养系初选、试管苗茎尖培养、热处理脱毒、试管苗移栽驯化、病毒检测、无病毒苗木快繁步骤，其中：1）营养系初选步骤：春季在蛇龙珠酿酒葡萄品种园选择无明显扇叶病毒症状的植株，作好标记，在此基础上于当年秋季选择结果性状良好、无明显或无卷叶病毒症状的植株，并作好标记；2）试管苗茎尖培养步骤：先于转年春季五月份，在葡萄品种园中剪取做好标记的各植株健康嫩梢上部，去掉叶片，剪成单芽茎段，用自来水冲洗2－3小时，备用；在超净工作台上，将上述备用单芽茎段用70％的酒精浸洗振荡10秒钟后，用0.1%升汞加一滴吐温，摇动5－10分钟后，用无菌水冲洗4‑5次，剪除两端接触药液部分，剪成1－2厘米单芽芽段，插于培养基上，进行培养，得到试管组培苗；3）热处理脱毒步骤：在超净工作台无菌条件下，将上述试管组培苗茎尖剪下0.1‑‑0.5cm，接种到培养基上，进行培养，成苗后继代培养，扩大繁殖待其生根；生根后，将其直接置于培养箱中，温度最初为25℃，以后用一个星期时间逐渐升温至37±1℃，并在该条件下培养1个月；4）试管苗移栽驯化步骤：取上述热处理后的试管苗的茎尖，0.3‑‑0.5cm左右，进行组织培养，培养温度为25±2℃，待培养瓶中的试管苗长至6－7cm时，在培养室或温室中将瓶口打开，敞口锻炼2‑3天后，去掉培养基，用20－25℃的水冲洗掉琼脂，栽入盛有蛭石的周转箱中，并用玻璃板或塑料薄膜盖好，保持其内小气候，湿度100％，温度25℃，每天喷水一次，并通风1.5‑‑2小时，3天后可开一小缝隙放风，以后逐渐将缝隙加大，直至全部揭开，每周喷一次营养液，驯化10天后，将其移入培养钵中培养成苗；5）病毒检测将营养钵中生长的葡萄苗的叶子取下，进行病毒检测，检测苗木是否带有葡萄病毒病；6）无病毒苗木快繁将上述检测无病毒的葡萄苗采用培养基进行上述步骤中组培、扩大繁殖及移载驯 化，形成无病毒苗木的快速繁殖。