[发明专利]一种基于化学衍生的尿液中甾体激素的检测方法

摘要

本发明涉及甾体激素高灵敏度检测，具体说是一种基于化学衍生的尿液中甾体激素的检测方法。采用一种新型的衍生化试剂4-二甲氨基苯甲酸对含羟基的甾体激素进行酯化，酯化产物用于液相色谱-质谱联用分析，由于衍生化反应提高了甾体激素的质谱离子化效率，从而实现了甾体激素高灵敏度检测，对21种甾体激素衍生化后的检测灵敏度高（均达到<1ng/mL）。本发明不但可实现高灵敏度检测，且可检测的甾体激素覆盖面广（包括雄激素、雌激素、皮质激素、孕激素）。该方法具有特异性好、精确、重复性高等特点。

主权项

一种基于化学衍生的尿液中甾体激素的检测方法，其特征在于：采用4‑二甲胺基苯甲酸作为衍生化试剂进行酯化，液相色谱‑质谱联用检测衍生化后的甾体激素，包括以下步骤：第一步，收集尿液，离心除杂质后保存；第二步，取第一步得到的尿液，采用SPE柱提取其中的甾体激素；第三步，过SPE柱的洗脱液进行冷冻干燥；第四步，在冷冻干燥的离心管内，加入4‑二甲氨基苯甲酸（DMAB）、4‑二甲氨基吡啶（DMAP）和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺（EDC）的二氯甲烷溶液，涡旋混匀，转移至玻璃进样小瓶中，盖上瓶盖密封，水浴加热进行衍生化，然后蒸干二氯甲烷溶液；第五步，加溶解液涡旋溶解残渣，等待液相色谱‑质谱联用进样分析；第六步，进行液相色谱‑质谱联用检测分析甾体激素。