[发明专利]一种定量检测MPL基因W515位点突变的试剂盒

摘要

本发明涉及一种检测MPL基因W515位点突变含量的试剂盒，属于生物技术领域。所述试剂盒包含MPL基因W515L位点突变特异性体系和MPL基因W515K位点突变特异性体系中至少一种体系及内参基因ABL体系，所述体系均包括上游引物、下游引物和Taqman荧光探针。研究表明MPL基因W515L位点突变和MPL基因W515K位点功能获得性突变率在PMF和ET中分别为10%和3%，而在PV中从未出现。因此，MPL基因W515L位点突变和MPL基因W515K位点突变主要用于诊断PMF和ET。采用敏感性及特异性均较高的荧光定量PCR检测MPL基因W515L位点突变和MPL基因W515K位点突变，其检测结果的特异性和敏感度均显著提高。本发明试剂盒为预测骨髓增殖性疾病的诊断提供了一种全新的快速简便的基因诊断技术。

主权项

一种检测MPL基因W515位点突变的试剂盒，包括检测用引物、荧光探针、荧光定量PCR混合液、阴性对照和阳性对照，其特征在于，所述检测用引物、荧光探针包括MPL基因W515L位点突变特异性引物和MPL基因W515K位点突变特异性引物中的至少一种和内参基因ABL引物及Taqman荧光探针，其中：MPL基因W515L位点突变特异性上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；MPL基因W515L位点突变特异性下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:2所示；MPL基因W515L位点突变特异性Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:3所示；MPL基因W515K位点突变特异性上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:4所示；MPL基因W515K位点突变特异性下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:5所示；MPL基因W515K位点突变特异性Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:6所示；ABL基因上游引物序列如序列表中SEQ ID NO:7所示；ABL基因下游引物序列如序列表中SEQ ID NO:8所示；ABL基因Taqman荧光探针如序列表中SEQ ID NO:9所示 。