[发明专利]一种高特异高敏感检测食源性致病性耶尔森氏菌的方法

摘要

本发明公开了一种高特异高敏感检测食源性致病性耶尔森氏菌的方法，包括以下步骤：步骤1）制备反应液；步骤2）将上述反应液放入63℃烘箱进行反应30-60min，浑浊为阳性;步骤3）提取临床分离空肠耶尔森氏菌，大肠耶尔森氏菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。本发明通过配制反应液，设计引物序列，能快速、准确的检测食源性致病性耶尔森氏菌，并及时采取相应的措施，减少了疾病的发生率。

主权项

一种高特异高敏感检测食源性致病性耶尔森氏菌的方法,其特征在于，包括以下步骤：步骤1）制备反应液反应液组成及含量为8u/ul Bst核酸聚合酶                          8u10X耐热聚合酶反应缓冲液                 1X，MgSO4 2mM4M 甜菜碱                                    1M10mM d‑NTP混合液                            400μM内引物   Y‑FIP                                   40umol   Y‑BIP                                   40umol外引物   Y‑F3                                    5umol   Y‑B3                                    5umol标本核酸                                    20ng添加焦碳酸二乙酯处理水至总量达到25ul;步骤2）将上述反应液放入63℃烘箱进行反应30‑60min，浑浊为阳性;步骤3）提取临床分离空肠耶尔森氏菌，大肠耶尔森氏菌，以及若干临床分离金黄色葡萄球菌、头皮葡萄球菌、人型葡萄球菌、表皮葡萄球菌、草绿色链球菌、大肠杆菌、克雷伯菌的核酸，多次进行反应，观察它们的阴阳性。