[发明专利]调整反应细胞浓度的流式细胞测速方法

摘要

本发明公开了一种调整反应细胞浓度的流式细胞测速方法。该方法通过对动员后采集液与设立的对照组外周血分别在流式细胞仪上所测得的流速进行比对，进而调整动员后采集液的反应细胞浓度在适宜范围，从而达到精确测定造血干细胞绝对计数的目标。该方法具有不增加任何成本，快速简便、易于操作，提高检测精确度和成功率的优势。

主权项

调整反应细胞浓度的流式细胞测速方法，其特征在于，它包括如下步骤：（1）准备抗凝新鲜正常人外周血0.5mL，动员后外周血采集液0.5mL；（2）流式细胞仪开机后首先进行仪器质控，保持电子仪器工作状态稳定；（3）取正常人外周血50μL加500μl生理盐水放入同一上机管中，采用流式细胞仪的中档进行测速，反复10次，记录每秒通过的细胞数，绘出测速所得的上下限范围；（4）取动员后外周血采集液50μL加500μL生理盐水放入同一上机管中，采用流式细胞仪中档进行测速，反复10次，记录每秒通过的细胞数；（5）将步骤（4）的得到的细胞数数据与步骤（3）得到的细胞数数据进行比对，确定动员后外周血采集液在造血干细胞CD34绝对计数分析中应稀释的倍数；（6）取稀释的动员后外周血采集液50μL加500μL生理盐水放入同一上机管中，采用流式细胞仪中档进行测速，当采集液最终的细胞数落在步骤第（3）测速所得的上下限范围内时，则该浓度采集液就可以进行造血干细胞CD34绝对计数的实验；（7）进行造血干细胞CD34绝对计数的常规操作流程。