[发明专利]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重组基因工程疫苗候选抗原I12C制备中的纯化方法有效

专利信息
申请号: 201210401223.X 申请日: 2012-10-19
公开(公告)号: CN102898511A 公开(公告)日: 2013-01-30
发明(设计)人: 顾江;邹全明;曾浩;董衍东;樊绍文;卢陆 申请(专利权)人: 重庆原伦生物科技有限公司;中国人民解放军第三军医大学
主分类号: C07K14/31 分类号: C07K14/31;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/16;C12N15/70;C12R1/19
代理公司: 重庆志合专利事务所 50210 代理人: 胡荣珲
地址: 401121 重庆市北部新*** 国省代码: 重庆;85
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摘要: 发明涉及一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重组双亚单位基因工程疫苗候选抗原I12C制备中的纯化方法,其包含步骤:收集制备的所述抗原;高压破菌、离心,硫酸铵分步沉淀,GST亲和层析、PP酶切、缓冲液置换、Resource Q层析、凝胶过滤层析技术的顺序组合对制备的I12C抗原进行纯化。本发明提供的纯化方法简捷、容易放大、重复性好,所获目标蛋白纯度高,动物试验证明纯化的抗原可有效刺激机体产生较高的体液免疫应答和良好的免疫保护作用,采用本发明方法纯化的抗原I12C,其纯度≥99%。
搜索关键词: 耐甲氧 西林 金黄色 葡萄球菌 重组 基因工程 疫苗 候选 抗原 sub 12 制备 中的 纯化
【主权项】:
一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌重组双亚单位基因工程疫苗候选抗原I12C制备中的纯化方法,其特征在于,该抗原I12C的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,其纯化方法包括以下步骤:A)收集自构建表达抗原I12C的大肠杆菌工程菌高密度发酵的菌体;B)采用高压破菌、离心,硫酸铵分步沉淀,GST亲和层析、PP酶切、缓冲液置换、Resource层析、凝胶过滤层析技术的顺序组合对制备的I12C进行纯化,获得了高纯度的I12C。
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